本制品是Pyrococcus Sp.由来的具有3′→5′Exonuclease (Proof reading活性) 的耐热性α型DNA聚合酶。与Pol I 型DNA聚合酶 (Taq DNA Polymerase等) 相比,α型DNA聚合酶具有PCR适用范围窄、最适反应条件难以确定等缺点。而Pyrobest DNA Polymerase所使用的Buffer已被优化,与Taq DNA聚合酶具有相同的扩增效率 (可扩增人基因组DNA约6 kb和λ DNA约12 kb大小的片段)。另外,Pyrobest DNA Polymerase具有3′→5′Exonuclease活性可以把错配的碱基除去,不仅适用于高保真性的PCR反应,还具有很高的反应性能。
目前使用的10×Pyrobest Buffer II同原来使用的10×Pyrobest Buffer相比,大大提高了PCR反应性能。
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■ 保存
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-20℃。
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■ 起源
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Escherichia coli carrying a plasmid that encodes the Pyrococcus sp. DNA polymerase gene.
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■ 活性定义
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用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位 (U)。
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■ 纯度
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10 U的本酶和0.6 μg的λ-Hind III、0.6 μg的Supercoiled pBR322 DNA或0.6 μg的λ DNA在74℃下反应1小时,均未检出内切酶和外切酶活性。
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