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■ 制品内容 (Code No.: RR042A)
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TaKaRa LA Taq HS
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125 U
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10×LA PCR Buffer II (Mg2+ Plus)(25 mM)
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1 ml
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dNTP Mixture (各2.5 mM)
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400 μl
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■ 制品说明
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本制品是抗Taq 单克隆抗体和TaKaRa LA Taq 的混合制品,适用于Hot Start PCR。高温加热前抗Taq 单克隆抗体与LA Taq 酶结合,抑制聚合酶活性,可以抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。抗Taq 单克隆抗体在PCR反应最初的DNA变性步骤中变性,无需特殊失活处理,可以在常规PCR条件下使用。
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■ 保存
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-20℃。
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■ 活性定义
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用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃、30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位 (U)。
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■ 纯度
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50 U的本酶和1 μg的λ-Hind III、1 μg的Supercoiled pBR322 DNA或1 μg的λDNA在74℃下反应1小时,均未检出内切酶和外切酶活性。
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■ 用途
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Hot Start PCR法扩增DNA片段,适用于15 kb以上DNA片段的 扩增。
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■ PCR产物
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使用本制品扩增得到的大部分PCR产物3’端附有一个“A” 碱基,因此可直接克隆于T-Vector中。但克隆片段过长 (大于5 kb),TA克隆效率将会降低。也可以将PCR产物进行末端平滑化和磷酸化后克隆到平滑末端载体中。
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■ PCR反应性能
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1. 以λ DNA为模板,可以很好地扩增20 kb和35 kb的DNA片段。
2. 以人的基因组DNA为模板,可以很好地扩增17.5 kb (β-Globin gene) 的DNA片段。
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