|
提取RNA可以不用氯仿了？Takara为您带来了RNAiso Easy
|
|
|
凭借着良好口碑、亲民价格，Takara RNAiso Plus在中国市场畅销多年，陪伴无数科研工作者开启了成功的实验。
经过不停探索，不断精进，2024年初，万众期待的Takara无需氯仿的RNA提取试剂RNAiso Easy成功问世——无需氯仿，安全高效，全程室温，单相提取，操作简单；使Takara的RNA提取品目更加丰富多彩，熠熠生辉。
|
|
|
|
无需氯仿的RNA提取试剂—RNAiso Easy
|
|
|
|
产品名称
|
概要
|
Code No.
|
包装量
|
|
RNAiso Easy
|
无需氯仿的RNA提取试剂
|
TCH020
|
100 ml
|
|
TCH021
|
200 ml
|
|
TCH022
|
25 ml
|
|
RNAiso Easy用于从动物组织、植物材料、各种微生物、培养细胞等样品中提取Total RNA。
在加入Solution H离心后，溶液会形成上清层及沉淀层，RNA分布在上清层中，收集上清层，经异丙醇沉淀便可以回收得到Total RNA。
|
|
|
|
|
♦ 单相提取，无需多相分层
♦ 全程可在室温进行操作
♦ 安全低毒，操作过程中无需使用氯仿
♦ 操作简单，1 h内即可完成Total RNA提取
♦ 提取的RNA完整性好，纯度高，基本不含gDNA污染，可用于多种分子生物学实验
|
|
|
|
|
1. 比肩经典，样本多元
|
（1）Total RNA提取质量检测
试剂：Takara经典的提取试剂RNAiso Plus（Code No. 9108）、无需氯仿的新产品RNAiso Easy（Code No. TCH020）
样品：293细胞、小鼠肝脏细胞
电泳上样量：500 ng
结果显示，RNAiso Easy具有与RNAiso Plus相当的RNA提取性能。
|
|
|
♦ 电泳检测：1% TAE Agarose Gel电泳
|
|
|
|
♦ RNA 完整度检测
|
|
|
|
（2）RT-qPCR 检出性能检测
RNA提取试剂：Takara经典的提取试剂RNAiso Plus（Code No. 9108）、无需氯仿的新产品RNAiso Easy（Code No. TCH020）
样品：小鼠脑组织
RNA起始量：500 ng/rxn total RNA
|
|
|
RT-qPCR试剂：
1-step RT-PCR RR066 One Step TB Green® PrimeScript? RT-PCR Kit；
2-step RT-PCR RR037 PrimeScript? RT reagent Kit ，RR820 TB Green® Premix Ex Taq™ II
扩增基因：B2m基因
结果显示，RNAiso Easy提取的RNA具有与RNAiso Plus提取的RNA相当的RT-qPCR检出性能。
|
|
|
♦ 1-step RT-qPCR检测
|
|
|
|
♦ 2-step RT-qPCR检测
|
|
|
|
（3）多种样本RNA提取性能检测
使用RNAiso Easy分别提取动物组织、植物组织及细胞样本的Total RNA，均取500 ng Total RNA进行电泳检测。
结果显示，A260/A280均在1.9-2.0之间，RNAiso Easy适用于不同类型样品的Total RNA提取，产物纯度高，完整性好。
|
|
|
|
|
|
♦ 电泳检测：1% TAE agarose gel，λ Hind III digest Marker
|
|
|
|
2. 同类比较，性能更佳
|
(1) Total RNA提取质量检测对比
试剂：RNAiso Easy、A公司产品、B公司产品、C公司产品
样品：小鼠肌肉、293细胞、向日葵幼苗叶片
结果显示，RNAiso Easy提取的RNA收量高、RIN值高于大部分同类产品；
RNAiso Easy的提取性能优于其他公司同类产品。
|
|
|
a.小鼠肌肉样本提取性能检测
♦ RNA收量
|
|
|
|
♦ RIN值检测
|
|
|
|
b. 293细胞样本提取性能检测
♦ RNA收量
|
|
|
|
♦ RIN值检测
|
|
|
|
c. 向日葵幼苗叶片样本提取性能检测
♦ RNA收量
|
|
|
|
♦ RIN值检测
|
|
|
|
（2）提取的Total RNA的RT-qPCR检出性能对比
RNA提取试剂：RNAiso Easy、A公司产品、B公司产品、C公司产品
样品：小鼠脑组织
RNA起始量：500 ng/rxn total RNA
反转录试剂：RR037 PrimeScript™ RT reagent Kit
qPCR试剂：RR820 TB Green? Premix Ex Taq? II
扩增基因：B2m基因
结果显示，相同RNA起始量进行RT-qPCR，RNAiso Easy提取的RNA检出Ct值更小，说明RNAiso Easy提取RNA的性能优于三款同类产品。
|
|
|
|
|
|
|
|
（3）提取的Total RNA的长片段RT-PCR扩增性能对比
RNA提取试剂：RNAiso Easy、RNAiso Plus、A公司产品、B公司产品、C公司产品
样品：小鼠肝脏、小鼠脑组织
RNA起始量：500 ng/rxn total RNA
反转录试剂：RR014 PrimeScript™ RT-PCR Kit
PCR试剂：Premix Taq™ (LA Taq™ Version 2.0)
扩增基因：Dnch1
结果显示，RNAiso Easy提取的RNA在长片段RT-PCR性能上，与RNAiso Plus相当，并且性能好于3款其他公司的同类产品。
|
|
|
♦ 电泳检测：1% TAE agarose gel，λ Hind III digest Marker
|
|
12 kb片段扩增检测——小鼠肝脏RNA
|
|
|
|
12 kb片段扩增检测——小鼠脑组织RNA
|
|
|
3. 产物不染，品质上乘
|
（1）提取的RNA不含RNase污染
使用RNAiso Easy提取的RNA样品37℃温育过夜，与-80℃保存后进行电泳检测
结果显示，提取的RNA经37℃温育过夜后，电泳检测条带没有发生降解，说明RNAiso Easy提取的RNA中不含RNase污染。
|
|
|
♦ 电泳检测：1% TAE agarose gel，DL2,000 DNA Marker
|
|
|
|
（2）提取的RNA不含gDNA污染
模板：500 ng/rxn Mouse liver total RNA
试剂：RR014 PrimeScript? RT-PCR Kit
结果显示，不添加RTase的PCR反应无扩增产物，说明RNAiso Easy提取的RNA中不含gDNA污染。
|
|
|
♦ 电泳检测：3% TAE agarose gel，100 bp DNA Ladder Marker
|
|
|
|
|
|
（本文内实验数据均来源于Takara Bio Inc.比较数据）
|
